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产品分类
DNeasy Blood & Tissue Kit
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DNeasy Blood & Tissue Kit 
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品牌: QIAGEN 别名: 从动物血液和组织、细胞、酵母、细菌或者病毒中纯化总DNA
货号: 69504/69506 规格: 50次/250次
保存: RT 货期: 5-7天

从动物血液和组织、细胞、酵母、细菌或者病毒中纯化总DNA

  • 为各种类型样本提供标准化的纯化方法

  • 即使是特殊类型起始样本也可以获得高产量DNA

  • 高品质DNA

  • 经过优化的操作方法适合处理多种起始样本

  • 可选择离心柱方式或96孔板高通量方式

DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅胶膜技术的离心柱或96孔板方式快速方便的纯化DNA。大多数样本可直接用蛋白酶K消化处理,无需机械破碎,减少了手动操作时间。为特殊样本提供优化的纯化方法,获得高重复性、高纯度的DNA,用于生物研究、基因型分析和兽医病理研究。DNA纯化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit,在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行。


DNA产量。

使用DNeasy Blood & Tissue Kit从100 µl全血中纯化DNA。羊:从50 µl羊全血中纯化DNA。使用超过50 µl的羊血时,DNA产量没有明显增加。鸡:从5 µl鸡全血中纯化DNA。鸟类血液中含有核红细胞,因此其DNA产量比哺乳动物的高。


高效的16重PCR。

使用DNeasy Blood & Tissue Kit从人类K562细胞中纯化基因组DNA。使用QIAGEN Multiplex PCR Kit对图示量的DNA和16对引物进行多重PCR,反应平行进行两次。M: 100 bp ladder。


高品质DNA。

使用DNeasy Blood & Tissue Kit从图示的动物样本中纯化DNA,并进行琼脂糖凝胶电泳分析。对于每个样本,都对0.5 µg未经过酶处理的DN(左侧)、或1 µg经过EcoRI处理的DNA(右侧)进行了分析。M: lambda-HindIII。


对马进行基因分型。

从三批棕色马的鬃毛中纯化获得DNA,并使用MSH和ASIP PCR对毛色基因型进行分析。[A] MSH PCR产物用TaqI酶处理。马1和2确定为Ee杂合体,携带红色毛色的隐性等位基因e。[B]对ASIP PCR产物分析得出,马1和2为Aa杂合体,携带黑色毛色的隐性等位基因a。+:黑色马Ee aa阳性对照。–阴性对照。M:标记物。


高通量纯化。

使用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit从24个小鼠尾和24个大鼠尾样本中纯化DNA。在1%的琼脂糖凝胶上进行DNA电泳分析。M: lambda-HindIII。


Real-time PCR。

Borrelia sp.是由蜱携带的病原体,可导致人类或其他哺乳动物患莱姆病。使用DNeasy Blood & Tissue Kit从蜱中纯化DNA。在LightCycler仪器上使用artus Borrelia LC PCR Kit,通过real-time PCR检测Borrelia DNA。阳性样本曲线的最低处对应每次PCR反应5个拷贝DNA。


对猪进行基因分型。

使用DNeasy Blood & Tissue Kit从猪耳刻样本中纯化DNA,然后使用Biotype AG公司的Animaltype Pig PCR Amplification Kit和QIAGEN HotStarTaq DNA Polymerase进行扩增。电泳图显示:12个多态性四核苷酸微卫星和一个性别鉴定标记物(SBH23)的遗传指纹图谱。


性能

高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能够从动物血液和组织样本中纯化大量的总DNA。优化的实验方案可确保非标准样本的高产量,如动物毛发和培养细胞、固定的组织,或者革兰氏阳性和阴性细菌。独特的在线实验方案参考文库,可从酵母、昆虫、毛发和其他类型样本中纯化DNA。


使用DNeasy Blood & Tissue Kits从动物组织中纯化的DNA产量

样本来源样本量DNA(µg)
哺乳动物血液100 µl3–6
鸟类血液5 µl9–40
HeLa细胞2 x 10615–25
肝脏25 mg10–30
25 mg15–30
肾脏25 mg15–30
脾脏10 mg5–30
小鼠尾1.2 cm(尾部)10–25
大鼠尾0.6 cm(尾部)20–40
猪耳25 mg10–30
马毛10 根毛发2–4
鱼鳍20 mg10–20
鱼卵(鲭鱼)10 mg5–10


DNeasy Blood & Tissue Kits简化了从多种样本类型中纯化DNA的流程,包括在生命科学、兽医学和基因分型研究应用中常见的动物种类。纯化得到的DNA不含PCR抑制剂,能在标准多重real-time PCR中进行灵敏的检测。DNeasy Blood & Tissue Kits确保了可靠的实验结果,从转基因小鼠的实验室分析到家畜的育种项目和种系基因分型研究。可以用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地扩大常规的检测应用的规模。


原理

DNeasy Blood & Tissue Kit适用于从不同的样本中,包括新鲜或冷冻的动物组织和细胞、血液或者细菌,快速纯化总DNA(如,基因组、线粒体和病原体等)。

DNeasy膜整合了硅胶膜的结合特性,经简单显微离心技术或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System处理即可。在高浓度离液盐的环境中,DNA吸附在DNeasy膜上,可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中设计的缓冲液条件,旨在使DNA特异性吸附到硅胶膜上,并且优化去除污染物和酶抑制剂。

纯化过程不需要苯酚或氯仿抽提或乙醇沉淀,仅涉及少量手工步骤。这使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常适合同时处理多个样本。对于高通量的应用,DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能够同时处理96或192个样本。


操作流程

可靠的硅胶膜技术,利用便捷的离心柱或96孔板形式,确保了快速可重复的DNA纯化,不再需要有机抽提和乙醇沉淀。样本首先用蛋白酶K裂解。调整缓冲条件,以提供最佳的DNA结合条件并将裂解物上样到DNeasy Mini离心柱或DNeasy 96孔板上。在离心过程中,DNA选择性地结合到DNeasy膜上,污染物通过。余下的污染物和酶抑制剂将在两个高效的洗涤步骤中被去除。然后,用水或缓冲液将DNA洗脱,待用。   

DNeasy Mini离心柱预装在收集管中,并且单独封存,确保方便和安全。使用DNeasy Mini离心柱的纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动进行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System以96孔板形式进行高通量处理。


应用

DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品质DNA,可直接用于多种下游分析,包括:

  • 生命科学研究

  • 家畜育种

  • 种系基因分型研究

  • 兽医病理分析研究

  • 常规的应用检测


特点

参数

Applications

PCR, real-time PCR, genotyping

Elution volume

100–200 µl

Format

96-well plate, spin column

Main sample type

Blood, tissue

Processing

Manual

Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein

DNA

Sample amount

100 µl/25 mg

Technology

Silica technology

Time per run or per prep

20 minutes – 1 hour

Yield

6 µg/30 µg


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